本试剂盒除用于从DNase处理、蛋白酶处理、RNA标记等酶反应液中纯化回收RNA外，还用于纯化试剂,通过其他方法提取得到的RNA。 纯化的全RNA无蛋白质污染，所得RNA可用于北仑布洛特、杜比罗特、mRNA提取、cDNA合成、引物扩增、差异显示等，那么，下面一起了解下RNA纯化试剂盒的使用方法吧!

　　该纯化试剂盒使用独特的离心吸附柱，同时大限度地除去蛋白质、无机盐离子和多种有机杂质等，在高盐条件下使RNA和硅胶吸附膜特异性结合，在低盐条件下RNA溶出。 可处理的RNA样品量为20g。

　　要预防RNase污染，请注意以下几点：

　　1 .经常更换新手套。 由于皮肤总是带有细菌，有可能会导致RNase污染。

　　2.使用RNase-Free的塑料制品和枪口避免交叉污染。

　　3.RNA在本产品中不会被RNase分解。 但是，要在提取后继续处理，请使用RNase-Free的塑料和玻璃器皿。 玻璃器皿在150下可以烘烤4小时，塑料器皿在0.5M NaOH中浸泡10min，然后用水完全清洗、灭菌，可以去除RNase。

　　4 .调制溶液应使用RNase-Free ddH2O。 )将水放入干净的玻璃瓶中，将DEPC浓度降至0.1%(v/v ) (放入v/v )，放置一晚，进行高压灭菌。

　　操作步骤：

　　初次使用前向RK中添加浓度1%的-巯基乙醇直至最后，例如向rk1mL中添加-巯基乙醇10L。 这个溶解液最好现在混合。 配合的RK可以在4下放置1个月。 溶液RK在储存时有可能形成沉淀。 有沉淀时，请加热溶解后使用。

　　初次使用前，请向冲洗液RW中加入无水乙醇。 装入量请参照瓶子的标签。

　　纯化试剂建议用冰浴进行以下步骤。

　　1 .在RNA样品中加入RNase-Free水，补充至100 l，加入350 l溶液RK (使用前请检查是否添加了-巯基乙醇()，仔细混合。

　　2 .加入无水乙醇250 l，充分搅拌，立即进入下一步。

　　3 .将之前得到的溶液与沉淀一起转移到吸附柱CR2中，以12000rpm离心30 sec，丢弃弯管的废液。

　　4 .向吸附柱CR2中加入500 l冲洗液RW (请先检查是否含有乙醇)，在室温下放置2 min后，以12000rpm离心30 sec，丢弃废液，将CR2放入捕捉管中。

　　5 .重复步骤4。

　　6.12000rpm离心5分钟，去除剩下的液体。

　　7 .将吸附柱CR2转移到新的离心管中，加入14-20L的Rnase-free水，在室温下放置2 min后，以12000rpm离心2 min，洗脱缓冲液的体积必须在14 l以上，体积过小会影响回收效率，洗脱液的pH值对洗脱效率影响很大。 用水制备洗脱液时，必须保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0时，洗脱效率降低; 另外，RNA生成物需要在-20下保存，防止RNA的分解。

　　8 .要提高RNA获取率，可以重复一次前面的操作，将得到的溶液组合两次。

　　以上介绍的就是RNA纯化试剂盒的使用方法，如需了解更多，可随时联系我们!