植物叶绿体纯化试剂大家来了解一下
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- 来源:
- 发布时间:2021-11-23
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【概要描述】植物叶绿体纯化试剂大家来了解一下。叶绿体是负责植物光合作用的重要细胞器,许多重要特性(如雄性不育)也与叶绿体有关,因此叶绿体是研究植物生理和母系遗传的重要材料。
植物叶绿体纯化试剂大家来了解一下
【概要描述】植物叶绿体纯化试剂大家来了解一下。叶绿体是负责植物光合作用的重要细胞器,许多重要特性(如雄性不育)也与叶绿体有关,因此叶绿体是研究植物生理和母系遗传的重要材料。
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植物叶绿体纯化试剂大家来了解一下。叶绿体是负责植物光合作用的重要细胞器,许多重要特性(如雄性不育)也与叶绿体有关,因此叶绿体是研究植物生理和母系遗传的重要材料。叶绿体纯化对于植物叶绿体的生化、遗传和分子生物学研究是必要的。该产品基于密度梯度离心,专门用作从植物叶片中纯化完整叶绿体纯化试剂。
植物叶绿体纯化试剂产品特性:
1.即用套件,用户无需单独准备各种解决方案。
2.提供AB两种选择。A型用于叶绿体的粗提,获得的叶绿体含有少量其他细胞器,可用于后续的SDS-PAGE、Western、ELSIA和蛋白质组分析。B型用于叶绿体提取,获得的叶绿体完整,可用于后续光合作用、电子链及磷酸化、跨膜转运、叶绿体蛋白质体外合成、蛋白质定位等研究。也可用于叶绿体膜、基质、类囊体、叶绿体DNA和叶绿体RNA的纯化。
3.这种产品足够提取15次,每次可以处理30克叶子,得到5毫克左右的叶绿体。
4.已成功应用于菠菜、大豆、生菜、大白菜、烟草和甜菜,并可在更多植物中使用(可能需要优化条件)。
植物叶绿体纯化试剂使用方法:
1.实验前1-2天将植物放在暗室中,减少叶绿体中淀粉颗粒的形成,否则这些颗粒在离心过程中很容易破坏叶绿体。在实验之前,应该用自来水清洗叶子,然后用蒸馏水冲洗以去除多余的水。如果收集后不能立即处理叶子,在储存过程中有必要保持叶子湿润。即便如此,叶子放置的时间也不能超过一天。
2.新鲜(实验当天)配制溶液A:将自带的去离子水与溶液A的一组分按4: 1的比例混合,然后将溶液A的二干粉加入到混合溶液中,直至终浓度为0.1%(每100mL加入0.1g干粉),摇匀溶解,得到溶液A,在冰上预冷备用。一个实验(从30克叶子中提取叶绿体)所需的溶液体积因材料而异。
3.采集新鲜植物叶片,快速去脉,将叶片切成1-3cm2大小的碎片,浸泡在适量的预冷溶液A中(每克叶片加入4mL溶液A,但对于烟草和大豆,每克叶片加入6mL溶液A)。
4.将浸泡在叶子中的溶液A转移到华林均质机(即国产制备果汁的均质机)中,低速均质10秒,避免起泡。用玻璃棒将液面上的碎屑压入均质机底部,然后低速均质10秒。
5.用带手柄的尼龙滤膜过滤匀浆。滤液可收集在预冷的200毫升量筒中,然后分成四个预冷的50毫升塑料离心管(每个管中的滤液不应超过35毫升)。带手柄的尼龙过滤膜可以重复使用。
南京中科拜尔医学技术有限公司 苏ICP备********号